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ELISA試劑盒稀釋血清的實驗步驟有哪幾步?

更新時間:2016-12-26   點擊次數:1964次

   在實驗的過程中,會遇到很多不一樣的問題,比如剛開始不知道什么樣的ELISA試劑盒好,該選擇什么樣的ELISA試劑盒來做實驗,還有做實驗可以稀釋血清嗎?等等,下面上海恒遠小編介紹一下為什么ELISA試劑盒實驗要稀釋血清,稀釋血清的原因又有哪些?

           
ELISA試劑盒實驗稀釋血清的步驟:

   先把蛋白稀釋一定的倍數,比如說10倍、20倍稀釋(這樣可以大體確定一個參數),將抗原進行一系列稀釋包被微量反應板,再用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進行孵育后洗滌,再加酶結合物進行反應,經孵育洗滌后,加底物溶液顯色,終止反應后分別測定o.d值,選擇o.d值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個o.d值稍大于1.0,而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清o.d值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的o.d值有明顯差別。


在ELISA試劑盒實驗血清為什么要稀釋?有兩個原因:
1、競爭抑制比較明顯,應稀釋競爭物;
2、血清中含有的性腺激素比較低,應該濃縮才對。

                                 




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