（技術篇）使用快速簡便的ELISA試劑盒需注意哪些?

   上海恒遠ELISA試劑盒擁有快速、簡便、準確、靈敏度高等幾大特點。ELISA實驗條件主要由實驗室的操作環境和操作人員的操作熟練程度兩方面組成，但試劑盒對實驗室操作環境的要求是幾種藥物殘留檢測方法中相對較低的。由于大部分的試驗操作步驟都是由實驗人員來完成的，人為的誤差相對嚴重一些。今天上海恒遠小編就來分享(技術篇)使用快速簡便的ELISA試劑盒需注意哪些問題及解決辦法：

問：加入稀釋劑是否會將樣本進一步稀釋？
答：因為稀釋劑是加入到所有的孔中，標準和被測樣本都被同樣稀釋，所以樣本的濃度可從標準曲線讀出，而不需作稀釋調整。

問：為什么不將測試范圍延伸到所述的靈敏度？
答：靈敏度是統計中大于零的可測到的zui低值。它是通過本底信號和試驗的可變性計算出來的。靈敏度是將20個零復制物的中值加兩個標準差從標準曲線換算成分析物的濃度。而zui低標準是我們可以放心的、仍可與標準曲線成直線相關的zui低點，因而是可定量的。

問：標準曲線為什么要采用4-pl擬合？
答：R&D在研發和質控我們絕大多數的quantikine ELISA試劑盒時，采用4-相參數的曲線擬合。一般來說，它比log-log和直線有更好的曲線擬合。如果數據分析不可用4-pl的話，log-log是下一個的選擇。

         
問：試驗步驟中說要用500rpm，我的搖床達不到。這個速度是正確的嗎？
答：500rpm使用的是0.12英寸的震蕩軌道。如果你的震蕩器用更大的震蕩軌道，500rpm的確是過快了。在這種情況下，你應根據R&D Systems的建議重新調整震蕩速度。你可拿一個多余的96孔微孔板，加入洗液，洗液的量與實驗時孔中的溶液量一致；封板后，調整震蕩器的速度，直到液體在孔的上部劇烈旋轉但不濺到封膜上或產生泡沫為止。

問：quantikine ELISA試劑為什么需要做稀釋？
答：① 在絕大多數的樣本中細胞因子的含量非常高，如不經稀釋，讀數將高于標準曲線；②也是zui普遍的原因我們建議做稀釋，是將樣本中的干擾或基質效應稀釋掉。

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