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大鼠內(nèi)皮型NO合酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒

更新時(shí)間:2022-08-29

簡要描述:

大鼠內(nèi)皮型NO合酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中大鼠內(nèi)皮型NO合酶3(eNOS-3)的含量。

型號:點(diǎn)擊量:749

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中大鼠內(nèi)皮型NO合酶3eNOS-3)的含量。

有效期:6個(gè)月

保存條件:2-8℃

本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

 

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包大鼠內(nèi)皮型NO合酶3eNOS-3)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠內(nèi)皮型NO合酶3eNOS-3)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

操作問題:

試劑準(zhǔn)備不當(dāng)可能影響酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA結(jié)果

在實(shí)驗(yàn)室,對試劑準(zhǔn)備一般不太注意,通常的做法是,在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。

    因此,在ELISA測定中試劑的準(zhǔn)備zui為關(guān)鍵的是,在實(shí)驗(yàn)開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20min以上后,再進(jìn)行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實(shí)驗(yàn)室使用時(shí)對所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時(shí)所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。

此外,當(dāng)試劑盒以O(shè)PD為底物時(shí),則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時(shí)配制。

大鼠內(nèi)皮型NO合酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒樣品要求

 ·客戶需提供待檢測抗體和包被用抗原。

 ·檢測的樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清、人和動(dòng)物的血清、血漿。

 ·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存,若長期保存應(yīng)-70℃。

 ·樣本量的要求:若一個(gè)指標(biāo)做復(fù)孔檢測應(yīng)不少于250ul,做單孔檢測應(yīng)不少于120ul。建議若客戶樣本量充足提供500ul以上。

  ·客戶的樣本收集后,立即按要求保存,切忌反復(fù)凍融。外地客戶郵寄需要用干冰運(yùn)輸。郵寄前請與溝通確認(rèn)。

大鼠內(nèi)皮型NO合酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒的回收率

    elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無機(jī)氯含量測定,樣品水中含有無機(jī)氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測定時(shí)忽略體積變化,如果測定出樣品中無機(jī)氯為2.98mg/L,則認(rèn)為回收率為98%。

對于定量檢測來說,主要還是一個(gè)準(zhǔn)確度的驗(yàn)證。不過我看到別人寫的內(nèi)容比我自己想說的要好,所以就貼上去了。相對回收率可能會(huì)高于100%的,如果只是說“損失程度”,其實(shí)是不準(zhǔn)確的。應(yīng)該說,回收率越接近100%,說明這個(gè)試劑盒的準(zhǔn)確度越高。

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